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关于病原微生物检测你有什么想了解的呢?

发布时间:2022-09-26      点击次数:97
  
  近年来发展起来的在微生物检测领域中一种新技术。其基本原理是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上,通过抗原抗体反应形成磁珠一目标病原体复合物或磁珠一一抗一目标病原体复合物,在外部磁场磁力的作用下,将目标病原体分离出来。目前已经开发出了针对各种病原体的免疫磁珠,如大肠埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、军团菌等,广泛应用到各级科研和实验室。经IMBS分离出的白色念珠菌可直接在显微镜下检测,检测时间缩短至4h。IM—Bs还可以和其它检测技术联合来检测病原菌,免疫磁珠分离得到的目标菌可继续用于分离培养使大肠埃希菌0157低检测限由200cfu·g提高到2cfu·g~;IMBS结合聚合酶链反应(IMBS—PCR)可对培养条件比较特殊的细菌如苛养菌、厌氧菌进行快速检测,肉类中的产毒素型产气荚膜梭菌经IMBS.PCR检测,检测时间缩短到10h,低检测限可达10cfu·g~,有研究者利用IMBS结合实时荧光定量PCR(IMBS—RT—PCR)成功检测出了水中的轮状病毒和草莓的诺如病毒,检测时间大大缩短;Leon—Velarde等利用IMB8结合酶联检测,大大提高了沙门菌的检测效率。
  病原微生物是指可以侵人体,在宿主中生长繁殖、释放毒性物质等引起机体不同程度病理变化、发生感染的微生物,包括细菌、病毒、真菌、寄生虫、衣原体、支原体等。病原微生物检测并非新领域,基于病原学证据的抗感染一直都是临床诊疗的'金标准'。如果能尽早识别致病病原、启动恰当的抗感染方案可改善患者预后,尤其是重症感染者。病原微生物检测在感染判定中意义重大,越来越多的检测技术引入临床,除了传统的检测方法如涂片染色、培养分离、免疫学技术、核酸检测等,还有二代测序技术(Next-generationsequencing,NGS)等。
  病原微生物检测的生物化学方法:
  原理:生化方法检測病原微生物实际上是测測定微生物特异性酶。由于各种微生物所具有的系统不*相同,对许多物质的分解能力亦不一致。因此可利用不同底物产生的不同代谢产物来间接检测该微生物内酶的有无,从而达到检测特定微生物的目的。
  辛酯酶法:快速检測沙门氏菌。沙门氏茵能产生辛酯酶,这一性能是除沙门氏菌外的各属肠杄茵科细茵所不具备的。以4-甲基伞形酮辛酯ハUCAP)为底物,经沙门氏菌的辛酯酶降解后,释放出4-甲基伞形酮(MU),在紫外灯下观察其发出的蓝色荧光。
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