哺乳动物骨髓细胞柔色体畸变验

一、哺乳动物骨髓细胞柔色体畸变验

染色体型畸变:染色体结构损伤，表现为在两个染色单体的相同位点均出现断裂或断烈重组的改变染色单体型畸变:染色体结构损伤，表现为染色单体断裂或染色单体断裂重组的损伤。染色体数目畸变:哺乳,动物细胞染色体数目的改变。

二、试验原理

使哺乳动物(如大鼠或小鼠)经口或其他适宜途径染毒，动物处死前用细胞分裂中期阻断剂处理，处死后制备骨髓细胞染色体标本，分析染色体畸变。

本方法特别适用于需考虑体内代谢活化后的染色体畸变分析

三、受试物要求

固体受试物需溶解或悬浮于溶剂中。

液体受试物可直接使用或予以稀释。

四、测试方法

1.颈椎脱的法处死动物，取出股骨，剔除肌肉等组织

2.剪去股骨两端，注射器5mL生理盐水从股骨一端注入，10mL离心管从股骨另一端接取流出的骨髓细胞悬液3.将细胞悬液以1000r/min 的速度离心5 min-7 min，去除上清液。

4加入0.075mol/L KCI溶液7ml处理

5.加入7mL固定液处理。

6.用混悬液以空气干燥或火焰干燥法制片。用姬姆萨染液染色

7.计数畸变细胞。

8.结果评价:结构畸变细胞率和每细胞内的染色体暗变数作为评价指标.阳性结果证明受试物具有引起该种受试动物骨髓细胞染色体畸变的能力阴性结果表明在本试验条件下受试物不引起该种受试动物骨髓细胞染色体畸变