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抗病毒检测是一个综合性强的技术术语，泛指运用细胞生物学、分子生物学、免疫学等手段，在体外或体内模型中定性或定量地评估某物质（包括化学合成药物、天然产物提取物、单克隆抗体、干扰素等）拮抗病毒复制周期的能力。该检测不仅是新药进入临床试验前的“入场券”，也是评价日常消毒产品、保健品抗病毒宣称的客观依据。
病毒的生命周期包括吸附、穿入、脱壳、复制、组装、释放六个环节。抗病毒检测的深层目标，正是要揭示待测物究竟干扰了哪个或哪几个环节。
将敏感细胞（如Vero E6细胞用于病毒）铺在96孔板中，形成单层。设置药物组、病毒对照组和细胞对照组。先给药物，再以感染复数（MOI）为0.01~0.1的病毒攻击。每日在倒置显微镜下观察细胞形态。
CPE通常分为4级：“-”为正常；“+”为<25%细胞病变；“++”为25%~50%；“+++”为50%~75%；“++++”为75%~100%。若药物组CPE显著低于病毒对照组，则初步判为有效。此法廉价直观，但主观性较强。
在铺满细胞的培养皿上覆盖琼脂或甲基纤维素，限制病毒子代不能通过液体扩散，只能感染邻近细胞，形成肉眼可见的“空斑”（每个空斑理论上源于一个感染性病毒颗粒）。加入待测药物后，统计空斑数量的减少率。该方法灵敏度高，量化准确，常用于干扰素抗病毒活性的标定。
这是目前最为灵敏和客观的方法。提取感染细胞内的总RNA或DNA，设计针对病毒保守序列（如ORF1ab基因）的特异性引物探针，通过RT-qPCR检测病毒核酸拷贝数。如果药物处理组相比对照组Ct值明显延迟（即拷贝数减少），则证明药物能抑制病毒复制。
该法可以进一步区分胞内核酸（反映复制水平）和胞外核酸（反映释放水平），甚至通过链特异性RT-PCR只检测负链RNA（复制中间体），从而精准定位药物作用于复制阶段。
利用荧光标记的病毒特异性抗体，直接染色感染细胞，通过荧光显微镜观察阳性细胞比例，或用流式细胞仪自动计数成千上万个细胞的感染率。此法快速，且可结合凋亡染料同时检测药物对细胞的保护作用。
细胞层面的阳性结果并不能代表体内有效。体内检测通常选用小鼠模型（如人源化ACE2转基因小鼠）、仓鼠模型或雪貂模型。
核心评价指标包括：
生存曲线：给药组与安慰剂组动物的存活率差异（最硬终点）。
器官病毒载量：取肺、脑等靶器官匀浆，进行病毒滴度滴定（TCID₅₀）。
组织病理学评分：观察HE染色切片中炎性细胞浸润、肺泡水肿的减轻程度。
抗病毒检测必须排除药物本身的细胞毒性造成的“假阴性”假象（即细胞都被药物杀死了，病毒当然无法复制，但这没有意义）。因此必须平行进行CCK-8或MTT细胞活力检测，并计算选择指数（SI），只有SI>2以上才认为具备初步开发价值。
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